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Title: Desnutrição proteica e atividade de áreas centrais em resposta à estimulação intermitente do barorreflexo.
Authors: Barbosa, Miriam Carmo Rodrigues
metadata.dc.contributor.advisor: Chianca Júnior, Deoclécio Alves
Keywords: Desnutrição
Hipertensão
Barorreflexo
Sistema nervoso simpático
Sistema nervoso parassimpático
Issue Date: 2012
Publisher: Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Pró-Reitoria de Pesquisa e Pós Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto.
Citation: BARBOSA, M. C. R. Desnutrição proteica e atividade de áreas centrais em resposta à estimulação intermitente do barorreflexo. 2012. 85 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Biológicas) - Universidade Federal de Ouro Preto, Ouro Preto, 2012.
Abstract: Estudos anteriores do nosso laboratório sugerem que a desnutrição protéica pós-desmame promove alterações na neurotransmissão dos reflexos cardiovasculares em ratos. O presente estudo avaliou se a desnutrição proteica altera a expressão da proteína c-fos (immediate-early gene expression) em importantes áreas envolvidas no controle dos reflexos cardiovasculares, após a estimulação intermitente do barorreflexo. Este estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética na Utilização de Animais (CEUA – UFOP; protocolo 2009/09). As principais áreas estudadas foram: núcleo paraventricular do hipotálamo (PVH); núcleo do trato solitário (NTS); região rostral ventromedial do bulbo (RVMM); região ventrolateral do bulbo - rostral (RVLM) e caudal (CVLM). Utilizamos ratos Fisher com 28 dias de idade divididos em dois grupos: Controle (C) (dieta padrão com 15% de proteína) e Desnutrido (D) (dieta hipoproteica com 6% de proteína). Após 35 dias de dieta, realizamos a canulação da artéria e veia femorais para os registros cardiovasculares e infusão de drogas, respectivamente. Dois dias depois, realizamos a ativação do barorreflexo através de infusões intermitentes de salina 0,9% (sal) ou fenilefrina (Phe - 0,25 mM; cada 3 min, por 30 min). Noventa minutos após estes procedimentos, os animais foram perfundidos com PBS 0,1M e PFA 0,1M a 4%. Os cérebros foram seccionados em fatias de 35μm e submetidos ao protocolo de imunohistoquímica para c-fos. Os cortes foram fixados em lâminas histológicas, e suas imagens adquiridas em microscópio Leica DM5000 e analisadas com o auxílio do software Leica Q Win. Os resultados foram expressos como média ± erro padrão da média. Os dados obtidos foram submetidos ao teste “t” de Student ou ANOVA “one-way” para medidas repetidas com pós-teste de Neuman-Keuls. Apesar de não alterar a PAM basal (D:105 ± 5 vs. C:115 ± 3 mmHg) e o ganho barorreflexo (D:- 1.5± 0.2 vs. C:-2.2 ± 0.5 bpm / mmHg), a desnutrição aumenta a FC basal (D:484 ± 28 vs. C:381 ± 17 bpm; P<0.05), e a expressão de c-fos na RVMM, mais precisamente no núcleo da raphe obscurus (Rob) após a infusão com Phe (D:81 ± 18 vs. C:29 ± 5; P <0,05). Foi observado aumento na expressão de c-fos após a estimulação intermitente do barorreflexo no PVH, NTS medial e CVLM, independentemente do protocolo dietético utilizado. Os dados revelaram um recrutamento neuronal diferenciado em resposta à estimulação do barorreflexo no NTS caudal comissural (Sal: 55 ± 5 vs. Phe:162 ± 20; P<0.05) e rostral (Sal: 79 ± 12 vs. Phe:205 ± 30; P<0.05), RVLM (Phe: 73 ± 14 vs. Sal:35 ± 3; P<0.05) e RVMM em animais desnutridos. Concluímos que a desnutrição protéica modifica o controle cardiovascular e o padrão de resposta central à estimulação do barorreflexo.
metadata.dc.description.abstracten: Previous studies from our laboratory suggest that protein malnutrition after weaning promotes changes in neurotransmission of cardiovascular reflexes in rats. The present study evaluates whether the protein malnutrition alters the expression of c-fos (immediate-early gene expression) in important areas involved in control of cardiovascular reflexes, after intermittent stimulation of the baroreflex. This study was approved by the Ethics Committee on Use of Animals (CEUA - UFOP; Protocol 2009/09). The main areas studied were: the paraventricular hypothalamus (PVH) nucleus solitary tract (NTS), rostral ventromedial medulla (RVMM), rostral (RVLM) and caudal ventrolateral medulla (CVLM). Male Fisher rats at 28 days old were divided into two groups: control (C) (standard diet containing 15% protein) and malnourished (MN) (low protein diet with 6% protein). After 35 days of diet, perform cannulation of the femoral artery and vein to record cardiovascular and drug infusion, respectively. Two days later, we performed a baroreflex activation by intermittent infusions of 0.9% saline (salt) or phenylephrine (Phe - 0.25 mM; every 3 min for 30 min). Ninety minutes after these procedures, the animals were perfused with PBS 0.1 M and 0.1 M PFA 4%. The brains were sectioned in slices of 35μm and submitted to the protocol of immunohistochemistry for c-fos. The sections were fixed on slides, and images acquired on Leica DM5000 microscope and analyzed using the software Leica Q Win. Results were expressed as mean ± standard error of mean. The data were subjected to the student t test or ANOVA "one way" for repeated measures with post-Neuman-Keuls test. Although not change the baseline MAP (MN: 105 ± 5 vs. C: 115 ± 3 mmHg) and baroreflex gain (MN: -1.5 ± 0.2 vs. C: -2.2 ± 0.5 bpm / mmHg), malnutrition increases the baseline FC (MN: 484 ± 28 vs. C: 381 ± 17 bpm, P <0.05), and expression of c-fos in RVMM, more precisely in the raphe obscurus (Rob) after infusion with Phe (MN: 81 ± 18 vs.. C: 29 ± 5, P <0.05). It was also observed increased expression of c-fos after intermittent baroreflex stimulation in PVH medial NTS and CVLM regardless of dietary protocol used. The data also revealed a differentiated neuronal recruitment in response to stimulation of the baroreflex in the caudal commissural (Sal: 55 ± 5 vs. Phe: 162 ± 20, P <0.05) and rostral NTS (Sal: 79 ± 12 vs. Phe: 205 ± 30, P <0.05), RVLM (Phe: 73 ± 14 vs. Salt: 35 ± 3, P <0.05) and RVMM in malnourished animals. We conclude that protein malnutrition modifies the cardiovascular control and the pattern of central response to baroreflex stimulation.
URI: http://www.repositorio.ufop.br/handle/123456789/2674
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