Desnutrição proteica e atividade de áreas centrais em resposta à estimulação intermitente do barorreflexo.

Abstract

Estudos anteriores do nosso laboratório sugerem que a desnutrição protéica pós-desmame promove alterações na neurotransmissão dos reflexos cardiovasculares em ratos. O presente estudo avaliou se a desnutrição proteica altera a expressão da proteína c-fos (immediate-early gene expression) em importantes áreas envolvidas no controle dos reflexos cardiovasculares, após a estimulação intermitente do barorreflexo. Este estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética na Utilização de Animais (CEUA – UFOP; protocolo 2009/09). As principais áreas estudadas foram: núcleo paraventricular do hipotálamo (PVH); núcleo do trato solitário (NTS); região rostral ventromedial do bulbo (RVMM); região ventrolateral do bulbo - rostral (RVLM) e caudal (CVLM). Utilizamos ratos Fisher com 28 dias de idade divididos em dois grupos: Controle (C) (dieta padrão com 15% de proteína) e Desnutrido (D) (dieta hipoproteica com 6% de proteína). Após 35 dias de dieta, realizamos a canulação da artéria e veia femorais para os registros cardiovasculares e infusão de drogas, respectivamente. Dois dias depois, realizamos a ativação do barorreflexo através de infusões intermitentes de salina 0,9% (sal) ou fenilefrina (Phe - 0,25 mM; cada 3 min, por 30 min). Noventa minutos após estes procedimentos, os animais foram perfundidos com PBS 0,1M e PFA 0,1M a 4%. Os cérebros foram seccionados em fatias de 35μm e submetidos ao protocolo de imunohistoquímica para c-fos. Os cortes foram fixados em lâminas histológicas, e suas imagens adquiridas em microscópio Leica DM5000 e analisadas com o auxílio do software Leica Q Win. Os resultados foram expressos como média ± erro padrão da média. Os dados obtidos foram submetidos ao teste “t” de Student ou ANOVA “one-way” para medidas repetidas com pós-teste de Neuman-Keuls. Apesar de não alterar a PAM basal (D:105 ± 5 vs. C:115 ± 3 mmHg) e o ganho barorreflexo (D:- 1.5± 0.2 vs. C:-2.2 ± 0.5 bpm / mmHg), a desnutrição aumenta a FC basal (D:484 ± 28 vs. C:381 ± 17 bpm; P<0.05), e a expressão de c-fos na RVMM, mais precisamente no núcleo da raphe obscurus (Rob) após a infusão com Phe (D:81 ± 18 vs. C:29 ± 5; P <0,05). Foi observado aumento na expressão de c-fos após a estimulação intermitente do barorreflexo no PVH, NTS medial e CVLM, independentemente do protocolo dietético utilizado. Os dados revelaram um recrutamento neuronal diferenciado em resposta à estimulação do barorreflexo no NTS caudal comissural (Sal: 55 ± 5 vs. Phe:162 ± 20; P<0.05) e rostral (Sal: 79 ± 12 vs. Phe:205 ± 30; P<0.05), RVLM (Phe: 73 ± 14 vs. Sal:35 ± 3; P<0.05) e RVMM em animais desnutridos. Concluímos que a desnutrição protéica modifica o controle cardiovascular e o padrão de resposta central à estimulação do barorreflexo.