Avaliação in vitro da atividade antiviral da silimarina contra o Zika virus (Flaviviridae).

Abstract

O Zika virus (ZIKV) é um arbovírus pertencente à família Flaviviridae e ao gênero Flavivirus. Em humanos, causa a febre Zika, uma doença com sintomas tais como febre, mialgia e cefaleia. Ainda, a infecção pelo ZIKV é relacionada a casos de microcefalia e síndrome de Guillain-Barré no Brasil. Até o momento, não há vacina licenciada e/ou tratamento específico para a febre Zika, portanto, a busca por compostos com atividade antiviral pode ser uma alternativa promissora para o tratamento da doença. Neste contexto, existem muitos compostos naturais capazes de gerar benefícios saudáveis, e a silimarina, um conjunto de flavonoides extraído da planta cardo de leite (Silybum marianum), se destaca pelas suas propriedades antioxidante, hepatoprotetora e antiviral. Assim, o principal objetivo desse trabalho foi avaliar a atividade antiviral in vitro da silimarina contra o ZIKV. A citotoxicidade da silimarina e sua atividade antiviral contra o ZIKV foram testados em células Vero, utilizando diferentes concentrações de silimarina e o ZIKV numa multiplicidade de infecção (moi) de 1. A viabilidade celular e a atividade antiviral global foram avaliadas através do teste de MTT (3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide). A capacidade da silimarina em reduzir o número de cópias do genoma viral foi também avaliada por qRT-PCR, bem como sua capacidade de inibir a formação das Unidades Formadoras de Placa (UFP). Posteriormente foi avaliada a atividade da silimarina em etapas pré e pós infecção e a capacidade de inativar a partícula viral e inibir as etapas de adsorção e penetração. Para tal, a silimarina foi adicionada às células em diferentes tempos e etapas da infecção viral e, após 24 horas, o sobrenadante foi coletado para determinar o título de vírus por contagem das UFP. A silimarina apresentou CC50 (Concentração Citotóxica para 50% das células) de 247μg/mL, CE50 (Concentração Efetiva para 50% das células) de 19,3μg/mL e IS (Índice de Seletividade) de 12,8, apresentando melhor atividade antiviral na concentração de 100μg/mL. A silimarina reduziu a produção viral em todos os tempos em que foi adicionada, sendo a maior redução observada quando foi feito um pré-tratamento das células, 2 horas antes da infecção. Ainda, a silimarina apresentou efeito virucida e de inibição da penetração e adsorção viral, reduzindo os títulos virais em cerca de duas unidades logarítmicas. Deste modo, é possível concluir que a silimarina possui significante atividade antiviral in vitro contra o ZIKV e, portanto, pode ser um forte candidato para ser utilizado no tratamento das infecções humanas causadas por esse vírus.