Análise das comunidades microbianas presentes em depósitos de minerais sulfetados com ocorrência de drenagens ácidas de minas e em sistemas de biolixiviação.

Abstract

Esse trabalho teve como objetivo identificar a diversidade microbiana de amostras sólidas e líquidas coletadas em uma mina de pirita abandonada nas proximidades de Ouro Preto, MG, Brasil. Para este projeto, foram utilizadas duas abordagens experimentais diferentes: uma primeira, mais convencional, baseada no cultivo de microrganismos associado a técnicas de identificação molecular FISH (Hibridação fluorescente“in situ”) e DGGE (Eletroforese em Gel de Gradiente Desnaturante) e a segunda abordagem, na qual as técnicas mencionadas anteriormente foram empregadas independentemente do cultivo prévio dos microrganismos visando preservar a biodiversidade natural das amostras. Os dados obtidos para essas amostras naturais foram comparados com aqueles obtidos na análise de sistemas de biolixiviação de minerais de zinco e níquel. O cultivo e isolamento de microrganismos ocorreu em meio para microrganismos heterótrofos e microrganismos autótrofos quimiolitotróficos. Para a análise por FISH utilizaram-se sondas específicas para hibridação na região 16S do RNA ribossomal das espécies Acidithiobacillus ferrooxidans, Acidithiobacillus thiooxidans, e Leptospirillum ferrooxidans. O DNA extraído de todas as amostras foi amplificado usando primers universais para o rDNA 16S através da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) e analisado por DGGE utilizando-se diferentes gradientes desnaturantes. As bandas observadas foram recortadas, clonadas e enviadas para o sequenciamento com finalidade de possibilitar posterior identificação dos microrganismos. A presença de Acidithiobacillus ferrooxidans e Acidithiobacillus thiooxidans nas colunas de lixiviação foi confirmada e foram obtidos fortes indícios de sua presença também no reator de lixiviação amostrado. Com relação às amostras de DAM, a ocorrência de Acidithiobacillus thiooxidans nas amostras coletadas foi confirmada por ambas as abordagens estudadas, entretanto, a presença de Acidithiobacillus ferrooxidans não foi observada. As bandas não identificadas foram clonadas e enviadas para seqüenciamento para completa caracterização. A presença de um microrganismo heterótrofo, pouco comum nesses ambientes foi observada. Trata-se de bactéria pertencente ao grupo Burkholderia, cuja atividade na solubilização de fosfato contido em minério de ferro foi recentemente relatada.