Aperfeiçoamento de nanobiossensor plasmônico para diágnostico direto de flavivirus.

Abstract

As doenças humanas associadas aos flavivirus causam crescente morbidade e mortalidade em todo o mundo. Essas doenças têm se espalhado consideravelmente nos últimos anos, e alguns fatores dificultam seu diagnóstico, tais como a reatividade antigênica cruzada, combinada com sintomas similares entre as infecções causadas por vírus pertencentes a essa família, a co- circulação de diferentes flavivirus e pouco acesso a ferramentas avançadas de diagnóstico laboratorial. As metodologias para diagnóstico de tais vírus passam por contínuas mudanças, de forma a aprimorar alguns parâmetros tais como sensibilidade, especificidade, baixo custo e acessibilidade. Nesse contexto, a Nanotecnologia vem ganhando espaço considerável para o aprimoramento de tais métodos, contando com uma ampla gama de nanomateriais disponíveis com propriedades particulares e vantajosas. Para esse trabalho, foi desenvolvido um biossensor por meio da ressonância plasmônica de superfície localizada (LSPR) utilizando nanobastões de ouro funcionalizados à polietilenoimina 0,3% e à 0,3 μg/mL de anticorpos anti-flavivirus D1- 4G2-4- 15/ATCC® HB-112TM. Tal biossensor foi testado com diferentes concentrações de vírus (106 , 105 , 104 , 103 e 102 ) expressas em UFP/mL. Foram usados como controle positivo o Dengue virus e o Zika virus (ambos pertencentes ao gênero flavivirus) e como controles negativos o Mayaro virus e o Chikungunya virus (ambos do genêro Alphavirus). O biossensor foi capaz de detectar os vírus de interesse em todas as concentrações analisadas. Foi utilizado o Teste t de student para análises de duas varáveis e o Teste one-way Anova juntamente com a análise Sidak’s para comparar múltiplas variáveis. Os dados foram normalizados usando o software GraphPad Prism versão 8.0. Com base nos dados obtidos observa-se que o biossensor conseguiu detectar e diferenciar os vírus do gênero flavivirus na faixa de concentração entre 106 e 102 UFP/mL.