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Title: Identificação de um gene, provavelmente envolvido no transporte ativo de glicerol em Wickerhamomyces anomalus (Pichia anomala).
Authors: Gomes, Lorena Soares
metadata.dc.contributor.advisor: Brandão, Rogélio Lopes
Teixeira, Janaina Aparecida
Keywords: Leveduras - fungos
Genética
Biotecnologia industrial
Glycerol
Issue Date: 2015
metadata.dc.contributor.referee: Castro, Ieso de Miranda
Nicoli, Jacques Robert
Citation: GOMES, Lorena Soares. Identificação de um gene, provavelmente envolvido no transporte ativo de glicerol em Wickerhamomyces anomalus (Pichia anomala). 2015. 42 f. Dissertação (Mestrado em Biotecnologia) – Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Universidade Federal de Ouro Preto, Ouro Preto, 2015.
Abstract: Existem micro-organismos capazes de utilizar o glicerol como fonte de carbono e energia, sendo assim, bastante atrativos como bioconversores do glicerol bruto gerado a partir da produção de biodiesel. Em Saccharomyces cerevisiaea via de metabolização do glicerol é bem definida, em que um sistema simporte de prótons, codificado pelo gene STL1, é preferencialmente utilizado na captação do glicerol quando fontes fermentáveis de carbono não estão presentes. O presente trabalho objetivou identificar o gene STL1 que codifica um provável transportador de glicerol em Wickerhamomyces anomalus LBCM105, cujo o genoma ainda não se encontra disponível em banco de dados. O gene identificado apresentou 1443 pb e 480 aminoácidos. A análise in sílico comparativa da região promotora identificou fatores de transcrição putativos associados à regulação de STL1 de W. anomalus LBCM105 e S. cerevisiae, sugerindo uma notável distinção entre os elementos putativos de ambos. A análise da arvore filogenética, construída a partir das sequências de proteínas Stl1 de diferentes leveduras, evidenciou uma maior similaridade entre o transportador putativo de W. anomalus LBCM105 e W. ciferrii, e uma maior distância em relação a S. cerevisiae. Após caracterização do gene STL1 de W. anomalus LBCM105, foram realizados análises da expressão gênica deste em condições de cultivo contendo glicose ou glicerol, como fonte de carbono. O gene STL1 apresentou uma expressão 23,76 vezes maior em glicerol em relação à condição de meio contendo glicose. A avaliação do transporte de glicerol pela W. anomalus LBCM105 evidenciou um transporte ativo em condições de cultivo contendo glicose ou glicerol, no entanto, Stl1p foi induzida em presença de glicerol. Os resultados apresentaram dados relevantes quanto à possível identificação do transportador de glicerol em W. anomalus LBCM105, evidenciando um potencial significativo na aplicação biotecnológica quanto ao consumo de glicerol bruto, resíduo da indústria de biodiesel, uma vez que demonstrou ser bastante eficiente na captação de glicerol.
metadata.dc.description.abstracten: There are microorganisms capable of using glycerol as carbon source, being very attractive to convert crude glycerol, a byproduct generated from the production of biodiesel. It is known that Saccharomyces cerevisiae glycerol metabolism pathway is well defined and a proton symport system encoded by STL1 is preferably used as the glycerol uptake when fermentable carbon sources are not present. This study aimed to identify the STL1 gene that encodes a putative glycerol transporter in Wickerhamomyces anomalus LBCM105, whose genome is not yet available in the database. The recognized and sequenced gene showed 1443 bp and 480 amino acids. The comparative analysis in silico of the promoter region identified putative transcription factors associated with the regulation of STL1 gene from W. anomalus LBCM105 and S. cerevisiae, suggesting a remarkable distinction between the putative elements of both. A phylogenetic tree analysis was constructed using different STL1 sequences from different yeasts showed less evolutionary distance between W. anomalus LBCM105 and W. ciferrii transporter, and a greater distance from S. cerevisiae. After characterizing the W. anomalus LBCM105 STL1 gene, gene expression analyzes were made using conditions containing glucose or glycerol as carbon source. STL1 showed a 23.76-fold higher expression in glycerol in relation to medium containing glucose. W. anomalus LBCM105 glycerol uptake evaluation showed an active transport in medium containing glucose or glycerol, however Stl1p was up-regulated in the presence of glycerol. The results demonstrate relevant data about the probable W. anomalus LBCM105 glycerol transporter characterization, indicating a significant potential for biotechnological applications as crude glycerol consumer, since it was very efficient in the uptake of glycerol.
Description: Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Pró-Reitoria de Pesquisa de Pós Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto.
URI: http://www.repositorio.ufop.br/handle/123456789/6570
metadata.dc.rights.license: Autorização concedida ao Repositório Institucional da UFOP pelo(a) autor(a) em 15/06/2015 com as seguintes condições: disponível sob Licença Creative Commons 4.0 que permite copiar, distribuir e transmitir o trabalho desde que sejam citados o autor e o licenciante. Não permite o uso para fins comerciais nem a adaptação.
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