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Title: Uso de fluorescência em um método de disector modificado para estimar o número de miócitos no tecido cardíaco.
Other Titles: Use of fluorescence in a modified disector method to estimate the number of myocytes in cardiac tissue.
Authors: Novaes, Rômulo Dias
Penitente, Arlete Rita
Silva, André Talvani Pedrosa da
Natali, Antônio José
Neves, Clóvis Andrade
Maldonado, Izabel Regina dos Santos Costa
Keywords: Cardiomiócitos
Coração
Morfologia
Issue Date: 2012
Citation: NOVAES, R. D. et al. Uso de fluorescência em um método de disector modificado para estimar o número de miócitos no tecido cardíaco. Arquivos Brasileiros de Cardiologia, v. 98, p. 252-258, 2012. Disponível em: <http://www.scielo.br/pdf/abc/v98n3/aop01312.pdf>. Acesso em: 21 out. 2015.
Abstract: Fundamento: Métodos convencionais de disector atualmente requerem consideráveis custos financeiros, técnicos e operacionais para estimar o número de células, incluindo cardiomiócitos, em uma área de 3D. Objetivo: Usar a microscopia de fluorescência em um método de disector modificado para determinar o número de miócitos no tecido cardíaco em condições normais e patológicas. Métodos: O estudo empregou ratos Wistar machos com quatro meses de idade e peso de 366,25 ± 88,21 g randomizados em grupos controles (GC, n = 8) e infectados (GI, n = 8). Os animais do GI foram inoculados com cepa Y de T. cruzi (300.000 tripomastigotas/50 g). Após oito semanas, os animais foram pesados e sacrificados. Os Ventrículos Esquerdos (VE) foram removidos para análise estereológica da densidade numérica de cardiomiócitos (Nv [c]) e o número total dessas células no VE (N [c]). Esses parâmetros foram estimados usando um disector fluorescente (DF) e comparados com os métodos convencionais de disector óptico (DO) e disector físico (DFi). Resultados: Em ambos os métodos de disector, os animais do GI apresentaram queda significativa de Nv[c] e N[c] em comparação com os animais do GC (p > 0,05). Uma correlação forte, igual ou superior a 96%, foi obtida entre DF, DO e DFi. Conclusão: O método DF parece ser igualmente confiável para determinar Nv[c] e N[c] em condições normais e patológicas, apresentando algumas vantagens em relação aos métodos convencionais de disector: redução de cortes histológicos e imagens na análise estereológica, redução do tempo de análise das imagens, a construção de DF em microscópios simples, utilizando o modo de epifluorescência, distinção de planos de disector em ampliações inferiores.
metadata.dc.description.abstracten: Background: Conventional disector methods currently require considerable financial, technical and operational costs to estimate the number of cells, including cardyomyocytes, in a 3D area. Objective: To use fluorescence microscopy in a modified disector method to determine the number of myocytes in cardiac tissue in normal and pathological conditions. Methods: The study employed four-month-old male Wistar rats with weight of 366.25 ± 88.21g randomized in control (CG, n=8) and infected (IG, n=8) groups. IG animals were inoculated with T. cruzi Y strain (300,000 trypomastigotes/50g wt). After eight weeks, the animals were weighted and euthanized. The left ventricles (LV) were removed for stereological analysis of numerical density of cardiomyocytes (Nv[c]) and total number of these cells in the LV (N[c]). These parameters were estimated using a fluorescent disector (FD) and compared with the conventional optical (OD) and physical (PD) disector methods. Results: In both disector methods, IG animals presented significant decrease of Nv[c] and N[c] compared to CG animals (P< 0.05). There was no significant difference in these variables despite the disector method applied in CG and IG animals (P> 0.05). A strong correlation, equal or above 96%, was obtained between FD, OD and PD. Conclusion: The FD method seems to be equally reliable to determine Nv[c] and N[c] in normal and pathological conditions and presents some advantages compared to conventional disector methods: reduction of histological slices and images in the stereological analysis, reduction of time to analyze the images, construction of FD in simple microscopes using the epifluorescence mode, distinction of disector planes in lower magnifications.
URI: http://www.repositorio.ufop.br/handle/123456789/6488
metadata.dc.identifier.doi: http://dx.doi.org/10.1590/S0066-782X2012005000014
ISSN: 1678-4170
metadata.dc.rights.license: Todo o conteúdo do periódico Arquivos Brasileiros de Cardiologia, exceto onde identificado, está sob uma licença Creative Commons que permite copiar, distribuir e transmitir o trabalho em qualquer suporte ou formato desde que sejam citados o autor e o licenciante. Não permite o uso para fins comerciais. Fonte: Arquivos Brasileiros de Cardiologia <http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_serial&pid=0066-782X&lng=en&nrm=iso>. Acesso em: 19 ago. 2019.
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