Identificação de proteínas associadas à carcinogênese induzida por Dibenzotiofeno e Dibenzotiofeno Sulfona em ratos Wistar.

Abstract

O alto conteúdo de compostos organossulfurados nos derivados de petróleo compromete sua qualidade; assim, sua remoção ou conversão a substâncias menos tóxicas são importantes etapas durante o processo de refino. Os limites de concentração para esses compostos estão sob rígido controle em diversos países com o objetivo de minimizar seu impacto negativo sobre a saúde animal e o ambiente. Dentre eles, o dibenzotiofeno (DBT) é um hidrocarboneto policíclico aromático que contém um átomo de enxofre em substituição em sua estrutura. Devido à importância dessas moléculas na oncogênese, e a escassez de investigações toxicológicas relacionadas ao DBT, este trabalho propôs realizar uma avaliação dos efeitos tóxicos e moleculares promovidos por um tratamento crônico de ratos Wistar com dose sub-letal (30 mg/kg) de DBT e seu derivado oxidado DBTO2 (dibenzotiofeno sulfona), ambos administrados durante 10 semanas. Em paralelo, seus efeitos tóxicos foram comparados com aqueles provocados pelo tratamento com o agente mutagênico clássico, 1,2-dimetilhidrazina (DMH), administrado na mesma dose durante o mesmo período. Na 14ª semana após a última dose, os animais foram sacrificados para uma avaliação inicial da contagem de células sanguíneas e das funções hepáticas e pancreáticas. Não foram observadas alterações nesses parâmetros. Entretanto, análises histopatológicas revelaram lesões de caráter pré-neoplásico nos intestinos dos animais tratados com DBT e DBTO2 que mostraram-se comparáveis em intensidade e alterações morfológicas com aquelas encontradas no cólon de animais tratados com DMH. Em concordância com esse achado, os marcadores tumorais CD44 e CEA (antígeno carcinoembrionário), utilizados em ensaios de imunohistoquímica demonstraram aumento de expressão de aproximadamente três vezes para os animais dos grupos Testes em relação aos animais dos grupos Controle. Análises proteômicas realizadas por eletroforese bidimensional (2D SDS-PAGE) demonstraram padrões de expressão proteica diferenciados entre os diferentes grupos. Além da análise proteômica, foi realizado ensaio de seleção de peptídeos ligantes de proteínas especificamente relacionados às alterações promovidas pelos indutores químicos utilizados, empregando a técnica de Phage Dislay. Tal metodologia permitiu a pré-seleção de seis peptídeos específicos e relacionados aos mecanismos de desenvolvimento/manutenção de câncer. A identificação das proteínas diferencialmente expressas observadas por 2D SDS-PAGE e, das proteínas alvo que interagem com peptídeos específicos relacionados às alterações promovidas por esses agentes químicos, auxilia no avanço do entendimento acerca dos mecanismos envolvidos no estabelecimento das lesões encontradas nos animais tratados com DBT e DBTO2.