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Title: Evidências para a presença de uma proteína receptora de IP3 em células de Saccharomyces cerevisiae.
Authors: Santana, Eduardo Perovano
metadata.dc.contributor.advisor: Brandão, Rogélio Lopes
Keywords: Proteínas
Saccharomyces cerevisiae
Homeostase
Biologia molecular
Issue Date: 2011
Publisher: Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Pró-Reitoria de Pesquisa e Pós Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto.
Citation: SANTANA, E. P. Evidências para a presença de uma proteína receptora de IP3 em células de Saccharomyces cerevisiae. 2011. 68 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Biológicas) - Universidade Federal de Ouro Preto, Ouro Preto, 2011.
Abstract: O bombeamento de prótons é um processo executado pela H+-ATPase de membrana plasmática Pma1p e é importante em Saccharomyces cerevisiae pois permite a captação de nutrientes através da criação de gradiente eletroquímico. Em presença de glicose esta enzima é ativada. Estudos preliminares mostram uma forte relação entre a presença de IP3, a liberação de cálcio vacuolar e ativação de Pma1p. Para a elucidação da via de liberação de cálcio faz-se necessária a identificação de proteínas receptoras de IP3 e suas relações que culminam neste processo. Com este objetivo nosso trabalho adotou duas estratégias independentes: a utilização de ensaio de afinidade seguida de tentativa de identificação por espectrometria de massas; e utilização de bancos de dados e recursos de bioinformática contígua a avaliações bioquímicas para uma identificação indireta através das interações descritas para Yvc1p, proteína responsável pela saída de cálcio. Na primeira estratégia, verificamos que os prováveis receptores de IP3 apresentam peso molecular entre 66 e 97 kDa, porém ainda não obtivemos a identificação por espectrometria de massas; na segunda estratégia, porém, chegamos a um grupo de seis proteínas (Yvc1p, Alg6p, Nmd2p, Mdm10p, Sse2p e Swc3p ) que estão relacionadas a liberação do cálcio vacuolar e que apresentam o peso molecular entre 66 e 97 kDa.
metadata.dc.description.abstracten: The pumping proton is a process carried out by the plasma membrane H+-ATPase Pma1p and is important in Saccharomyces cerevisiae since it allows the uptake of nutrients through the formation of electrochemical gradient. In the presence of glucose this enzyme is activated. Preliminary studies show a strong correlation between the presence of IP3, the release of intracellular calcium and activation of Pma1p. To elucidate the pathway of calcium release it is necessary to identify IP3 receptors and their relationship that culminate in this process. In this work we adopted our goal of two independent strategies: the use of affinity assay followed by identification tentative by mass spectrometry, and use of databases and contiguous bioinformatics resources to biochemical evaluations for indirect identification through interactions described for Yvc1p, protein responsible for the output of calcium from vacuole. In the first strategy, we found that likely IP3 receptors have molecular weights between 66 and 97 kDa, but not yet obtained the mass spectrometry identification. In the latter strategy, however, we come to a group of six proteins (Yvc1p, Alg6p, Nmd2p, Mdm10p, Sse2p and Swc3p) that are related to vacuolar calcium output and that present molecular weight between 66 and 97 kDa.
URI: http://www.repositorio.ufop.br/handle/123456789/2594
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