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Título: Caracterização molecular de cepas de Staphylococcus aureus isoladas no Hospital Municipal de Ipatinga-MG.
Autor(es): Morais, Mônica Mendes Cordeiro Araújo
Orientador(es): Cota, Renata Guerra de Sá
Palavras-chave: Caracterização molecular
Staphylococcus aureus
Resistência antimicrobiana - hospitais - Ipatinga (MG)
Data do documento: 2011
Editora / Evento / Instituição: Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Pró-Reitoria de Pesquisa e Pós Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto.
Referência: CORDEIRO, M. M. Caracterização molecular de cepas de Staphylococcus aureus isoladas no Hospital Municipal de Ipatinga-MG. 2011. 71 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Biológicas) - Universidade Federal de Ouro Preto, Ouro Preto, 2011.
Resumo: Infecções causadas por Staphylococcus aureus resistente à meticilina podem ter consequências graves para os pacientes de serviços de saúde. Diversas medidas de controle são implementadas no sentido de conter a dispersão destes microrganismos, mas nem sempre são suficientes. O objetivo deste trabalho foi identificar cepas de S. aureus sensíveis (MSSA) e meticilina-resistentes (MRSA) pertencentes ao banco de dados do Laboratório de Análises Clínicas da Prefeitura Municipal de Ipatinga/ MG isoladas de amostras clínicas de pacientes colonizados por S. aureus internados no período de abril de 2008 a abril de 2009. Durante um ano foram identificados 439 isolados e deste conjunto, 50 (11,4%) apresentaram características morfológicas e fenotípicas de S. aureus e destes seis (12%) isolados mostraram resistência a pelo menos um dos 18 antibióticos testados, enquanto nenhuma cepa foi resistente à vancomicina. Para analisar a estrutura populacional de S.aureus foi utilizada a técnica de PCR - eletroforese em gel de poliacrilamida desnaturante (DGGE). Inicialmente, o DNA genômico foi extraído e os amplicons específicos para as regiões V5-V3 do 16S DNAr bacteriano foram obtidos e analisados por DGGE. Nossos resultados sugerem grandes variações genéticas anos isolados de S. aureus. As cepas de MRSA também foram caracterizadas através da análise da expressão de genes envolvidos em resistência utilizando a técnica de qRT-PCR. Nossos resultados mostram uma variação significativa no perfil de expressão entre os genes mecA-1, mecR1-2, mecl3, norA4 e norA5 quando comparamos os isolados de MRSA, sugerindo que o perfil de expressão pode ser influenciado pela variação genotípica observado entre os isolados. Em conjuntos os resultados permitem concluir que vários clones de S. aureus circulavam entre os pacientes de internados no Hospital Municipal de Ipatinga. Futuros experimentos serão realizados para aperfeiçoar o uso da técnica de PCR-DGGE para a identificação rápida de S. aureus.
Resumo em outra língua: Infections caused by methicillin-resistant Staphylococcus aureus can have serious consequences for patients of health services. Several control measures are implemented to contain the spread of these microorganisms, but not always sufficient. This work was identifying strains sensitive of Staphylococcus aureus (MSSA) and methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) belonging to the database of the Clinical Laboratory of the Municipality of Ipatinga / MG isolated from clinical specimens from patients colonized with S. aureus hospitalized from april 2008 to april 2009. During one year was identified 439 isolates and these set, 50 (11.4%) showed morphological and phenotype characteristic of S. aureus and 6 (12%) isolates were resistant to at least one antibiotic while no strain was resistant to vancomycin. To analyze the population structure of S.aureus we using PCRDenaturing gradient gel electrophoresis (DGGE) approach. Initially the genomic DNA was been extracted and amplicons specific to V3-V5 regions of the bacterial 16S DNAr were obtained and analyzed by DGGE. Our results suggest a high genetic variation in S. aureus isolates. The MRSA strains were further characterized by testing for various multi drugs genes using qRT-PCR. Our results showed a variation on profile of expression between mecA-1, mecR1-2, mecl3, norA4 and norA5 genes in MRSA strains isolated, suggesting that the profile of expression can be influenced by the genotype variation observed among these isolates. We concluded that various clones of S. aureus was been circulating in the patients from Ipatinga. According to our results, future efforts should be directed toward optimizing the use of PCR-DGGE as a toll to rapid identified S. aureus.
URI: http://www.repositorio.ufop.br/handle/123456789/2457
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