Solubilidade em equilíbrio pelo método da agitação orbital em frascos : padronização e definição dos fármacos controle.

Abstract

A solubilidade de um fármaco nos líquidos biológicos é fator primordial para sua absorção e atividade terapêutica. O método da agitação orbital em frasco (shake-flask) para avaliação da solubilidade de fármacos é o mais aceito e recomendado pelas entidades reguladoras. O Sistema de Classificação Biofarmacêutica (SCB) propõe o agrupamento dos fármacos em quatro classes de acordo com sua solubilidade em condições fisiológicas e permeabilidade nas membranas biológicas. Para correta classificação dos fármacos, de acordo com o SCB, é importante a disponibilidade de dados confiáveis de solubilidade e permeabilidade. Os dados de solubilidade e as informações advindas do SCB podem ser empregados para decisão quanto à bioisenção de novos produtos. É importante ressaltar que ainda não existem, na literatura científica, protocolos padronizados do método da agitação orbital em frascos empregando fármacos de alta e baixa solubilidade. Por consequência, muitos dados disponíveis apresentam grande discrepância, devido às diferentes condições experimentais empregadas nos testes. Neste estudo foi selecionado como fármaco controle de baixa solubilidade a nimesulida e, como controle de alta solubilidade, o propranolol. Foi desenvolvido e validado um método analítico por cromatografia a líquido de alta eficiência (CLAE) com detecção por ultravioleta, para quantificação de nimesulida, e um método por CLAE para quantificação de propranolol com detecção por fluorescência, em cada um dos meios tamponados que mimetizam as condições fisiológicas do TGI (fluido gástrico simulado sem enzimas (FGSSE pH 1,2), tampão acetato (TA pH 4,5) e suco entérico simulado sem enzimas (SESSE pH 6,8)). Os métodos foram validados e mostraram serem seletivos, lineares, precisos, exatos e robustos. Posteriormente, foram avaliadas as solubilidades da nimesulida e propranolol utilizando o método da agitação orbital em frascos, com as condições do teste ajustadas. Em seguida, foram selecionadas e analisadas condições experimentais do método (quantidade do excesso de matéria prima, temperatura, velocidade de agitação e volume da alíquota retirada) que poderiam afetar as avaliações das solubilidades dos fármacos. A análise da influência de cada condição experimental foi realizada variando-se um parâmetro experimental por vez, mantendo-se os outros constantes. Foram comparadas as médias das solubilidades em equilíbrio das avaliações de solubilidade pela estatística t de Student, (α = 0,05). Como principais resultados foram obtidos, para ambos os fármacos, que a temperatura empregada durante o teste deve ser rigorosamente controlada, pois esse parâmetro afetou os resultados de solubilidade. A velocidade de agitação de 150 rpm promoveu rápida obtenção do equilíbrio entre as fases. Para o fármaco de baixa solubilidade, a quantidade do excesso de matéria prima, demonstrou ser um parâmetro crítico, dessa forma recomenda-se a utilização de pequeno excesso. A partir dos resultados desse estudo, foram obtidas as principais recomendações para avaliação da solubilidade de fármacos pelo método da agitação orbital em frascos.