Complexidade do proteoma de Schistosoma mansoni na miniatura da fase larval miracídio.

Abstract

A esquistossomose é um problema de saúde pública muito comum nas regiões tropicais ou subtropicais do globo. No Brasil, o agente etiológico da esquistossomose é o Schistosoma mansoni, uma das principais espécies do gênero responsáveis pelo alto índice de morbidade e impacto socioeconômico provocados pela doença. Esse parasito possui um ciclo biológico complexo envolvendo dois hospedeiros: um definitivo mamífero, que inclui os seres humanos, e um hospedeiro intermediário, representados, no Brasil, por moluscos do gênero Biomphalaria. Existem muitos estudos publicados abordando a análise proteômica de alguns estágios de vida desse platelminto, porém a caracterização proteômica em larga escala da fase larval de vida livre, a qual infecta o hospedeiro invertebrado, ainda é muito restrita. Nesse contexto, o objetivo deste trabalho foi caracterizar o proteoma solúvel e de membrana do miracídio de S. mansoni. Os ovos foram recuperados a partir da digestão tríptica dos fígados de camundongos BALB/c infectados. As proteínas solúveis foram obtidas por intermédio da homogeneização da larva em tampão Tris-HCl pH 7,5 contendo inibidores de proteases e a fração de membrana recuperada por centrifugação. Em ambos os extratos foi adicionado surfactante para garantir uma melhor solubilização das proteínas hidrofóbicas. Os peptídeos oriundos da digestão tríptica das proteínas foram analisados por nanocromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas. Ao todo, 2.555 sequências de proteínas foram identificadas. As análises individuais dos proteomas solúvel e de membrana forneceram 1.604 e 1.947 identidades, respectivamente. A categorização funcional das proteínas ocorreu via Gene Ontology, sendo possível detectar uma variedade de vias metabólicas e de sinalização celular nesse estágio larval. Um conjunto seleto de peptídeos, tais como NPP-1 prepropeptide\x3b Putative neuropeptide e neuropeptide Y prohormone 1, bem como proteínas relacionadas ao sistema nervoso do parasito foram identificados, pioneiramente, nesse trabalho. A quantificação label free das proteínas totais, por sua vez, determinou a abundância relativa de 642 biomoléculas, as quais incluem proteínas de membranas, proteínas secretadas, proteínas Venom Allergen-Like e proteases. A análise proteômica shotgun dessa fase larval de S. mansoni contribuiu para o melhor entendimento da composição molecular do parasito e apontou vias que podem ser de particular interesse no contexto da relação parasito-hospedeiro.