REPOSITÓRIO UFOP :: Navegando por Autor "Silva, Glenda Nicioli da"

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Additive effects of resveratrol and doxorubicin on bladder cancer cells.
(2022) Soares, Luciana Bicalho Moreira; Lima, Ana Paula Braga; Melo, André Sacramento; Almeida, Tamires Cunha; Teixeira, Luiz Fernando de Medeiros; Silva, Glenda Nicioli da
The treatment of bladder cancer remains a challenge in clinical practice. Different chemotherapeutic protocols can be used; however, it is common to observe tumor recurrence and secondary effects that result in toxicity. Doxorubicin (DOX), one of the most effective anticancer agents used to treat bladder cancer, can cause chronic cardiotoxicity, limiting its use in clinical practice. Resveratrol (RES), a natural product with potential antitumor activity against bladder cancer, is associated with rapid metabolism and low bioavailability and needs to be combined with chemotherapeutic drugs to improve its use. Our study aimed to assess the therapeutic effect of a low concentration of DOX (2µM) in combination with RES (150, 200 and 250µM) on two bladder cancer cell lines. We investigated the mechanism of interaction between the drugs by performing cytotoxicity, clonogenic, oxidative stress, cell migration, cell morphology and nuclear division index (NDI) assays. Cytotoxicity evaluation revealed an additive interaction between RES and DOX for both cell lines. Additionally, the results of cell colony formation, oxidative stress, cell migration, cell morphology and NDI assays showed that a combination of DOX and RES was more effective than RES or DOX alone. In conclusion, a low concentration of DOX combined with RES could potentiate the antitumor effects of the drugs on bladder cancer cells, thus overcoming the secondary effects caused by DOX and the low bioavailability of resveratrol.
Angiotensin‐converting enzyme gene (ACE) polymorphisms are associated with dysregulation of biochemical parameters in hypertensive patients.
(2023) Agostini, Lívia da Cunha; Cunha, Warlley Rosa; Silva, Nayara Nascimento Toledo; Melo, André Sacramento; Soares, Luciana Bicalho Moreira; Almeida, Tamires Cunha; Belo, Vanessa de Almeida; Vital, Wendel Coura; Teixeira, Luiz Fernando de Medeiros; Lima, Angélica Alves; Silva, Glenda Nicioli da
Introduction The genetic component, including genes and their variants, plays a signifcant role in the pathophysiology of arterial hypertension (AH). Thus, clinical, epidemiological and genetic studies have been carried out to improve the under- standing of disease mechanisms, improve diagnostic quality and contribute to prevention. Objective To determine the association of risk factors, biochemical parameters and diferent ACE gene polymorphisms with AH. Method The case-control study was carried out in the population of Ouro Preto, Brazil. The subjects answered a question- naire containing clinical and sociodemographic data. The ACE gene polymorphisms rs4291, rs4363 and rs4335 were evalu- ated by real time-polymerase chain reaction (real-time PCR) in 310 people (155 hypertensive and 155 normotensive patients), in addition to biochemical parameters. A multivariate logistic regression model was used to identify factors associated with AH. Analysis of continuous variables was performed using the Kruskal-Wallis test to assess signifcance between groups and Dunn’s post-test for multiple comparisons. Results The results showed that AH was associated with age, education, smoking, obesity and high levels of triglycerides, sodium, glucose and uric acid. Regarding the biochemical parameters, in hypertensive patients, the rs4363 and rs4335 poly- morphisms were associated with high levels of triglycerides, urea and glucose; the rs4291 polymorphism was associated with elevated urea and glucose levels. No association was detected between SNPs and HA. Conclusion AH was associated with socioeconomic status, lifestyle habits and biochemical parameters. ACE polymorphisms may have infuenced the levels of triglycerides, urea and glucose in hypertensive patients.
Anti-serum validation for use in immunohistochemistry for Trypanosoma cruzi detection.
(2018) Azevedo, Paulo Hernane Rabelo; Xavier, Marcelo Antônio Pascoal; Silva, Glenda Nicioli da; Costa, Priscilla Almeida da; Carneiro, Cláudia Martins; Brasileiro Filho, Geraldo
Introduction: The detection of Trypanosoma cruzi in tissue samples is important in many situations, such as testing of the reactivation of the infection. The detection of T. cruzi nests in endomyocardial biopsies (EMB) may be useful to evaluate graft rejection. Given their scarcity, such nests are not routinely identified. To increase the diagnosis sensitivity, immunohistochemistry (IHC) may serve as a promising strategy. Here, we validate an antiserum for the detection of T. cruzi infection by IHC. Methods: We used 1) positive controls (PCs) – 13 EMB, 12 skin biopsies, and 1 heart with T. cruzi nests as sections stained with hematoxylin and eosin (HE); 2) negative controls – a) 10 explant hearts and 10 EMB with no amastigote nests or clinical/laboratory signs of chagasic infection; and b) eight samples with leishmaniasis, toxoplasmosis, or histoplasmosis; and 3) Cases – 31 EMB of chagasic patients with no parasite nests in HE sections but detected positive for T. cruzi DNA by polymerase chain reaction. As a primary antibody, a hyperimmune serum from T. cruzi-infected rabbits was used. Results: IHC results were positive for 21 of 26 PCs (80.8%) and one case of cutaneous leishmaniasis. In 4 of 31 cases, IHC revealed nests (12.9%), which were undetected by conventional histological examination. Conclusions: This study shows that IHC with the tested antiserum increases the sensitivity of the diagnosis and may be recommended for routine use in EMB analyses of cardiac transplant patients with Chagas disease.
Antibacterial substances from leaves of Protium spruceanum (Burseraceae) : in vitro and in silico evaluation.
(2020) Amparo, Tatiane Roquete; Rodrigues, Ivanildes Vasconcelos; Seibert, Janaína Brandão; Almeida, Tamires Cunha; Cabral, Vivette Appolinário Rodrigues; Vieira, Paula Melo de Abreu; Brandão, Geraldo Célio; Oliveira, Mauro Lúcio Gonçalves de; Silva, Glenda Nicioli da; Santos, Orlando David Henrique dos; Vieira Filho, Sidney Augusto; Teixeira, Luiz Fernando de Medeiros; Souza, Gustavo Henrique Bianco de
Due to the increase of bacterial resistance, the search for new antibiotics is necessary and the medicinal plants represent its most important source. The aim of this study was to evaluate the antibacterial property of extract and fractions from Protium spruceanum leaves, against pathogenic bacteria. By means of diffusion and microdilution assays, the crude extract was active against the nine bacteria tested being the hydromethanolic fraction the most active. During phytochemical procedures, procyanidin (1) and catechin (2) were identified as the main antibacterial constituents of this fraction. In silico results obtained using PASSonline tool indicated 1 and 2 as having good potential to interact with different targets of currently used antibiotics. These results no indicated potential to none DNA effect and indicated the cell wall as mainly target. Electrophoresis result supported that had no DNA damage. Cell wall damage was confirmed by propidium iodide test that showed increased membrane permeability and by cell surface deformations observed in scanning electronic microscopy. The in vitro assays together with the in silico prediction results establish the potential of P. spruceanum as source of antibacterial compounds that acts on important bacterial targets. These results contribute to the development of natural substances against pathogenic bacteria and to discovery of new antibiotics.
Antiproliferative and toxicogenomic effects of resveratrol in bladder cancer cells with different TP53 status.
(2019) Almeida, Tamires Cunha; Guerra, Camila Chaves Coelho; Assis, Bárbara Letícia Gonçalves de; Soares, Rodrigo Dian de Oliveira Aguiar; Garcia, Camila Carrião Machado; Lima, Angélica Alves; Silva, Glenda Nicioli da
The antitumor activity of resveratrol, a polyphenolic compound found mainly in grapes, has been studied in several types of cancer. In bladder cancer, its antiproliferative effects have already been demonstrated; however, its mechanism of action is not completely understood. The aim of this study was to evaluate resveratrol antitumor activity (12.5, 25, 50, 100, 150, 200, and 250 μM) and its possible mechanisms of action in bladder tumor cells with different TP53 gene status (RT4, grade 1, TP53 wild type; 5637-grade 2 and T24-grade 3, TP53 mutated). Cell proliferation, clonogenic survival, morphological changes, cell cycle progression, apoptosis rates, genotoxicity, global methylation, immunocytochemistry for p53 and PCNA and relative expression profiles of the AKT, mTOR, RASSF1A, HOXB3, SRC, PLK1, and DNMT1 were evaluated. Resveratrol decreased cell proliferation and induced DNA damage in all cell lines. Regarding the long-term effects, resveratrol reduced the number of colonies in all cell lines; however, TP53 wild type cells were more resistant. Increased rates of apoptosis were found in the TP53 wild type cells and this was accompanied by AKT, mTOR, and SRC downregulation. In addition, the resveratrol antiproliferative effects in wild type TP53 cells were accompanied by modulation of the DNMT1 gene. In the TP53 mutated cells, cell cycle arrest at S phase with PLK1 downregulation was observed. Additionally, there was modulation of the HOXB3/RASSF1A pathway and nuclear PCNA reduction in the highest-grade cells. In conclusion, resveratrol has antiproliferative activity in bladder tumor cells; however, the mechanisms of action are dependent on TP53 status.
Antitumor effect of Cymbopogon densiflorus (Linneu) essential oil in bladder cancer cells.
(2020) Pereira, Gizele Lucia da Costa; Almeida, Tamires Cunha; Seibert, Janaína Brandão; Amparo, Tatiane Roquete; Soares, Rodrigo Dian de Oliveira Aguiar; Rodrigues, Ivanildes Vasconcelos; Souza, Gustavo Henrique Bianco de; Santos, Orlando David Henrique dos; Silva, Glenda Nicioli da
The aim of this study was to analyse the antitumor effect of the Cymbopogon densiflorus essential oil in silico and in vitro on bladder cancer cells RT4 and T24, with different TP53 status. The oil was extracted by hydrodistillation and the gas chromatography coupled to the mass spectrometry was used for characterisation. In silico analysis was carried out by Pass online software. Cytotoxicity, cell proliferation, cell cycle progression, apoptosis and wound healing assays were performed. Five major compounds were identified. In silico analysis showed that major compounds present high potential for antitumor activities. The treatment with C. densiflorus essential oil reduced cell viability of bladder cancer cells. Only in wild-type cells, the increase of apoptosis rates and the decrease of cell migration were observed. In conclusion, the C. densiflorus essential oil presents antitumor effects on TP53 wild-type and mutated bladder cancer cells, however, the mechanism of action is TP53 status-dependent.
Antitumoral activity of micellar solutions containing allyl isothiocyanate : an in vitro study.
(2021) Almeida, Tamires Cunha; Oliveira, Daiane Teixeira de; Sávio, André Luiz Ventura; Perasoli, Fernanda Barçante; Silva, Glenda Nicioli da; Barichello, José Mario
Introduction: Several natural products exhibit promising antineoplastic activity against bladder cancer cells, including allyl isothiocyanate (AITC). However, the AITC irritates the mucous membranes and induces eczematous or vesicular skin reactions. Thus, pharmaceutical formulations are necessary to overcome these problems. The aim was to develop micellar solutions containing AITC and investigate their antitumoral activity in bladder carcinoma cell lines. Method: The micellar solutions were prepared by cold dispersion method. Subsequently, we evaluated cytotoxicity, cell proliferation, cell cycle kinetics and long-term effects of micelles in bladder cancer cells. Results: Cytotoxicity and cell proliferation assays showed there was an increase in AITC activity when it was encapsulated in micelles. We also observed cell cycle arrest in the S phase after treatment with AITC-micelles. Furthermore, the formulation was able to maintain the long-term effects of free AITC. Conclusions: The micellar solutions developed can become an interesting approach for administration of AITC in the treatment of bladder cancer.
Avaliação da atividade anti-Trypanosoma cruzi in vitro e in vivo do composto silibinina isolado e associado ao benznidazol.
(2019) Torchelsen, Fernanda Karoline Vieira da Silva; Lana, Marta de; Silva, Glenda Nicioli da; Murta, Silvane Maria Fonseca; Brandão, Geraldo Célio; Lana, Marta de
A doença de Chagas (DC) é uma doença parasitária endêmica na América Latina e encontrada em diversos países no mundo. Seu tratamento é feito com o benznidazol (BZ) e o nifurtimox (NF), ambos fármacos com baixa eficácia terapêutica na maoria dos pacientes em fase crônica tardia da DC, e que causam vários efeitos colaterais. A busca por novos fármacos para a DC é estimulada entre produtos naturais e em estratégias como associação de fármacos. A silibinina (SLB) é um composto natural capaz de inibir a proteína de efluxo (Pgp) nas membranas celulares, induzir a morte de microrganismos, além de possuir atividade anti-inflamatória. Ainda não há na literatura relato de sua atividade em T. cruzi. Neste trabalho foi avaliada a atividade in vitro e in vivo de SLB e de SLB associada a BZ (SLB+BZ) frente a cepa Y de T. cruzi. Foi realizado ensaio de citotoxicidade pelo método de MTT em células VERO (24h), que revelou IC50 de 250,22 µM para a SLB. A atividade tripanocida avaliada por método com resazurina em epimastigotas (24h) mostrou que a SLB 25 µM inibiu o crescimento dos parasitos. O ensaio em amastigotas revelou índice de seletividade de 3,13, além de mostrar a maior porcentagem de inibição (> 90%) quando a SLB foi usada na associação de SLB100+BZ10µM, em comparação com SLB (100; 25; 6,25 µM) ou BZ (10; 5; 2,5 µM) isolados. No ensaio in vivo, camundongos Swiss comprovadamente infectados IP com 10.000 tripomastigotas sanguíneos foram tratados por via oral por 20 dias consecutivos com SLB50, SLB150, SLB50+BZ25, SLB50+BZ50, SLB50+BZ100, SLB150+BZ25, SLB150+BZ50, SLB150+BZ100, BZ25, BZ50 e BZ100 mg/kg/dia. Os animais foram avaliados diariamente na fase aguda (parasitemia) e aos 90, 180 e 240 dias após tratamento por hemocultura, qPCR de eluato sanguíneo e sorologia (ELISA). Após a eutanásia, foram feitas, além das avaliações anteriores, a qPCR do tecido cardíaco. Os resultados in vivo demonstraram que a SLB em monoterapia não foi capaz de controlar a parasitemia e a mortalidade dos animais. As avaliações parasitológicas mostraram 100% de negatividade na maioria dos grupos de animais tratados com combinação de drogas ou doses menores de BZ, enquanto a sorologia foi positiva em todos os animais não sendo constatada cura pelo critério clássico. Entretanto verificamos que os grupos experimentais tratados com BZ em menores doses e que os tratados com BZ em menores doses quando associado a SLB apresentaram maior negatividade nos exames parasitológicos, porém sem diferenças significativas entre os demais grupos. Análise histopatológica cardíaca será feita para avaliar se houve redução da inflamação/fibrose entre os grupos tratados com a associação SLB+BZ versus BZ.
Avaliação da atividade antitumoral in vitro de soluções micelares contendo alil isotiocianato.
(2016) Almeida, Tamires Cunha; Silva, Glenda Nicioli da; Barichello, José Mario; Costa, Daniela Caldeira; Silva, Gisele Rodrigues
O alil isotiocianato (AITC), composto majoritário da semente de mostarda, vem sendo bastante estudado quanto a sua atividade antineoplásica. Neste trabalho foram desenvolvidas soluções micelares de Pluronic® F127 (F127) contendo AITC e o potencial antitumoral destas formulações foi avaliado in vitro em linhagens celulares de carcinoma de bexiga com diferentes status do gene TP53 (RT4 – TP53 selvagem e T24 – TP53 mutado). As formulações foram preparadas pelo método de dispersão a frio (DF) e pelo método de reidratação de filme polimérico (RFP). A quantidade de AITC incorporada as formulações foi determinada por cromatografia líquida de alta eficácia acoplada a detector UV. Os resultados demonstraram que pelo método DF, aproximadamente 96,5% do AITC adicionado durante a preparação foi incorporado na formulação final. Entretanto, pelo método RFP ocorreu perda de mais de 75% da quantidade de AITC adicionada, mostrando que a preparação de micelas por esse método não foi viável. A avaliação da citotoxicidade e da proliferação celular foi realizada 24 e 48 horas após tratar as células das duas linhagens de tumor de bexiga por 3 horas com as formulações de AITC produzida pelo método DF. Células tratadas com AITC solubilizado em Tween (AITC livre) e células tratadas com os excipientes da formulação foram usadas como controles. Após 24 horas do tratamento, as formulações contendo AITC nas concentrações 0,0925; 0,125; 0,25 e 0,5μM causaram citotoxicidade na linhagem RT4; entretanto, na linhagem T24, somente a concentração mais alta (0,5 μM) promoveu diminuição no número de células. Nenhuma citotoxicidade foi observada para o AITC livre. Após 48 horas, todas as concentrações das formulações contendo AITC levaram a reduções significativas da viabilidade celular em ambas as linhagens celulares. Além disso, as formulações foram mais citotóxicas para as células RT4 do que para as células T24, contribuindo com a hipótese de que células carregando o gene TP53 mutado são mais resistentes a quimioterápicos. Posteriormente realizou-se o ensaio de sobrevivência clonogênica. Tanto as soluções micelares contendo AITC quanto o AITC livre foi capaz de reduzir o número de colônias formadas. Assim, podemos afirmar que soluções micelares aceleram a ação de AITC nas células tumorais avaliadas. Desta forma, as formulações desenvolvidas podem ser uma abordagem interessante para a futura administração oral dessa substância no tratamento do tumor de bexiga.
Avaliação da citotoxicidade e da atividade in vitro de sistemas autonanoemulsionáveis contendo fármacos anti-Trypanosoma cruzi.
(2016) Castro, Kelly Christyne Miranda Pereira de; Bahia, Maria Terezinha; Mosqueira, Vanessa Carla Furtado; Bahia, Maria Terezinha; Leite, Elaine Amaral; Silva, Glenda Nicioli da
Para melhorar a eficácia de fármacos como nifurtimox, benznidazol e ravuconazol pode-se utilizar sistemas autonanoemulsionáveis para entrega de fármacos (SNEDDS). O estudo teve como objetivos: (i) avaliar a toxicidade dos SNEDDS e dos respectivos excipientes utilizados no preparo dos SNEDDS Nfx 1 e 2, SNEDDS Bz 3 e SNEDDS Rv 4 em células H9c2, uma linhagem de cardiomiócitos de ratos neonatos, e Hep G2, uma linhagem de hepatócitos de carcinoma humano; e (ii) avaliar a atividade anti-Trypanosoma cruzi dos SNEDDS Nfx 2 e SNEDDS Rv 4 in vitro, utilizando como modelo experimental células H9c2 infectadas pelas cepas Y e Colombiana do T. cruzi. Os excipientes usados no preparo dos SNEDDS não induziram diminuição da viabilidade das células H9c2 e Hep G2 nas mesmas concentrações usadas nas formulações nas doses efetivas de tratamento (5 e 10 μM, para nifurtimox; e 2nM, para ravuconazol). No entanto, o Tween 80 usado no preparo das formulações SNEDDS Nfx 1 e SNEDDS Bz 3, mostrou-se tóxico nos testes de citotoxicidade em células Hep G2, nas concentrações entre 0,065% e 0,26% v/v, reduzindo a viabilidade em mais de 40%. Os SNEDDS Nfx 1 e SNEDDS Bz 3 foram tóxicos a partir da concentração de 25 μM referente ao fármaco livre, por isso não foram realizados os testes de atividade com estes SNEDDS. O SNEDDS Nfx 2 apresentou menor toxicidade em relação ao SNEDDS Nfx 1, apresentando toxicidade a partir da concentração de 50 μM; e o SNEDDS Rv 4 não apresentou toxicidade significativa. Com isso, os SNEDDS Nfx 2 e SNEDDS Rv 4 foram utilizados nos testes de atividade in vitro e apresentaram efeito inibitório superior aos respectivos fármacos livres sobre formas amastigotas das cepas Y e Colombiana do T. cruzi. Este estudo in vitro evidenciou que os SNEDDS podem ser formulações seguras e potencialmente mais ativas contra as formas amastigotas do parasito.
Avaliação da genética do parasito e do hospedeiro, biologia do parasito e clínica da doença de Chagas em duas gerações de uma família.
(2017) Lima, Ana Paula Braga; Silva, Glenda Nicioli da; Lana, Marta de; Silva, Glenda Nicioli da; Machado, Carlos Renato; Machado, Evandro Marques de Menezes
A doença de Chagas, causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi, é considerada uma doença multifatorial em que há interação de fatores do parasito e do hospedeiro. Estudos de correlação genética do parasito com suas propriedades biológicas, associando-as à genética do hospedeiro, vem sendo realizados com o objetivo de prever a evolução da infecção, auxiliando no diagnóstico, controle e conhecimento de sua epidemiologia. A proposta deste projeto foi avaliar a genética e a biologia do T. cruzi e a genética do hospedeiro de duas gerações de uma família com diagnóstico da doença de Chagas, procedentes da região do Alto Paranaíba, MG, constituída de mãe e suas cinco filhas. Amostras de sangue das voluntárias foram coletadas objetivando isolar o parasito e caracterizá-lo geneticamente. Entretanto, somente o parasito de uma única amostra foi isolado, sendo pertencente ao grupo genético ou DTU TcII. Na ausência de isolados do parasito da mãe e de quatro de suas filhas, a continuidade da caracterização genética do T. cruzi foi feita pela técnica de PCR-LSSP, com o objetivo de verificar a variabilidade intraespecífica do parasito. Com os resultados obtidos, um dendograma UPGMA foi construído, no qual as amostras foram divididas em três grupos distintos. O valor do índice Shannon (0,492) e a média do valor da heterozigosidade por locus (0,322) foram baixos, indicando baixa variabilidade genética entre os parasitos. A única amostra de parasito isolada apresentou baixa taxa de crescimento em meio de cultura acelular (LIT) e alta taxa de infectividade em células VERO e em camundongos. Três genes humanos relacionados à cardiopatia (TNF, WISP1 e TGF-β1) foram avaliados e as seis voluntárias apresentaram os mesmos genótipos para os três genes. Na ausência de diferenças genéticas, as voluntárias foram estudadas pelos questionários SF-36 (Versão Brasileira do Questionário de Qualidade de Vida) e Escala de Depressão Geriátrica de Yesavage para avaliar a autopercepção do estado de saúde e possibilidades de transtornos afetivos/depressivos. As voluntárias apresentaram transtornos afetivos associados a uma ruim/negativa auto-percepção do estado de saúde. Em conclusão, a compreensão da evolução clínica da DC vai além dos aspectos genéticos e biológicos do parasito e de aspectos genéticos do hospedeiro.
Avaliação da participação de processos redox na síndrome de Cockayne.
(2019) Guerra, Camila Chaves Coelho; Garcia, Camila Carrião Machado; Garcia, Camila Carrião Machado; Machado, Carlos Renato; Silva, Glenda Nicioli da
O reparo por Excisão de Nucleotídeos (NER) é um importante mecanismo que auxilia na manutenção da integridade do genoma, sendo responsável pelo reparo de lesões que causam distorções na fita dupla do DNA. Mutações em algumas proteínas que participam da via NER estão associadas ao desenvolvimento de doenças severas, como a Síndrome de Cockayne (CS), cujo os principais sintomas são neurodegeneração e envelhecimento precoce. Sabe-se que os processos redox estão relacionados ao desenvolvimento de doenças neurodegenerativas como Alzheimer e Parkinson, pela sua capacidade de reagir com biomoléculas, principalmente o DNA. Evidências na literatura mostram que processos redox também sejam um dos fatores que possam contribuir para a progressão da Síndrome de Cockayne (CS). O objetivo desse trabalho foi avaliar a participação dos processos redox em CS. Inicialmente, realizamos uma extensa análise dos trabalhos já publicados na literatura com descrições de mutações para a síndrome, a fim de identificarmos uma possível relação entre tais mutações, funcionalidade das proteínas e o fenótipo dos pacientes. Em seguida, a sensibilidade à indução de processos redox foi avaliado em modelos celulares mutados nas proteínas CSA e CSB, após tratamento com BSO e peróxido de hidrogênio. Também, analisamos o perfil redox do cérebro e fígado de camundongos envelhecidos por 1,5, 12 e 24 meses deficientes e proficientes na proteína CSA, por meio da quantificação de proteínas carboniladas, grupos tióis e atividade da enzima Glutationa Peroxidase. Nossos dados apontam a inexistência de relação clara entre mutações e fenótipos manifestados pelos pacientes. Além disso, mostram que as células mutadas em CSA e CSB apresentam sensibilidade diferencial entre si e entre o grupo controle, indicando que mutações diferentes no mesmo gene conferem respostas específicas frente a uma situação de indução de processos redox. Em relação aos experimentos com tecidos dos animais, detectamos redução da concentração de proteínas carboniladas no cérebro de camundongos CSA com o envelhecimento. De maneira geral, os dados indicam uma não relação entre mutação e sintomas manifestados pelos pacientes, assim como nos resultados dos in vitro. Ressaltamos também a necessidade do desenvolvimento de modelos animais e celulares que melhor representem o fenótipo da doença e possibilitem o seu estudo de maneira mais precisa, para que os mecanismos de indução e progressão de CS sejam completamente elucidados.
Avaliação de RNAs não codificadores longos específicos de Schistosoma mansoni, como candidatos a biomarcadores da esquistossomose murina.
(2021) Rocha, Flávia Arêdes; Cota, Renata Guerra de Sá; Cota, Renata Guerra de Sá; Cabral, Fernanda Janku; Silva, Glenda Nicioli da
RNAs não codificantes longos (lncRNAs) possuem um importante papel na regulação transcricional e pós-transcricional. São classificados como transcritos maiores que 200 nucleotídeos, que não apresentam potencial de codificar proteínas, sendo observados tanto no núcleo como no citoplasma. Estudos recentes vêm demonstrado que, dependendo de sua localização e de suas interações específicas com DNA, RNA e proteínas, os lncRNAs podem modular a função da cromatina, alterar a estabilidade e a tradução de mRNAs citoplasmáticos e interferir nas vias de sinalização. Muitas dessas funções, em última análise, afetam a expressão gênica em diversos contextos biológicos e muito provavelmente estão relacionados aos mecanismos referentes à interação parasito-hospedeiro. Por outro lado, os padrões de expressão estágio-específico sugerem que os lncRNAs são biomarcadores em potencial para a detecção da esquistosomose, uma parasitose debilitante e de grande impacto socioeconômico no mundo, causada por platelmintos do gênero Schistosoma. Acredita-se que a complexidade dos programas de diferenciação e desenvolvimento observado entre os diferentes estágios evolutivos e ambientes onde o parasita vive seja dependente da regulação da expressão gênica, e neste cenário os lncRNAs seriam moléculas chave. As hipóteses desse trabalho são que o S. mansoni expressa um conjunto de lncRNAs de forma diferencial através da reprogramação de sua expressão gênica em determinados estágios evolutivos, e que esses lncRNAs são importantes na interação parasito-hospedeiro. Recentemente, nosso grupo de pesquisa identificou um conjunto de 170 novos lncRNAs em S. mansoni e deste conjunto, quinze mostraram expressão diferencial quando comparado os estágios larvais e adultos do verme, bem como entre machos e fêmeas. Continuando essa linha de investigação, o objetivo desse trabalho foi avaliar a expressão de 47 lncRNAs nos estágios de cercárias, esquistossômulos com 3,5h de cultivo in vitro, vermes adultos e ovos, bem como em amostras de fígado e sangue de camundongos BALB/c infectados e não infectados com S. mansoni. Do conjunto de 47 lncRNAs avaliados, 29 foram considerados como expressos em vermes adultos, utilizando a técnica de qRT-PCR. A seguir, este conjunto se mostrou diferencialmente expresso entre os estágios evolutivos avaliados. Posteriormente foram realizados testes qualitativos e quantitivos utilizando fígado e sangue de camundongos infectados e não infectados, apresentando detecção de lncRNAs específicos de S. mansoni no hospedeiro mamífero. Em conjunto, podemos concluir que os lncRNAs são diferencialmente expressões em S. mansoni e com potencial de biomarcador.
Avaliação de síndrome metabólica e determinação de novos pontos de corte para os fatores associados à síndrome em mulheres no climatério.
(2022) Gouvea, Thiago Magalhães; Lima, Angélica Alves; Lima, Angélica Alves; Lima, Luciana Moreira; Bem, Daniela Amorim Melgaço Guimarães do; Veloso, Vanja Maria; Silva, Glenda Nicioli da
Vários fatores desempenham papel no desenvolvimento da Síndrome Metabólica (SM), como variáveis individuais, ambientais e comportamentais, além do próprio envelhecimento. São poucos os estudos de SM em mulheres no climatério com dados representativos da população brasileira, especialmente diferenciando os estágios do envelhecimento reprodutivo. Ainda há indefinição dos melhores pontos de corte para os componentes individuais e sobre a inclusão de outros componentes ou substituição dos utilizados atualmente. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar prevalência da SM em mulheres na fase reprodutiva tardia, transição menopausal e pós-menopausa e determinar novos pontos de corte para os fatores associados à Síndrome. Para isto, foram selecionadas 711 mulheres, entre 45 e 60 anos, usuárias do Sistema Único de Saúde de Ouro Preto, MG. Foram realizadas entrevistas para coleta de dados sociodemográficos e comportamentais; avaliação clínica, antropométrica e laboratorial. A partir desses dados foram calculados índice de massa corporal (IMC), relação cintura-quadril (RCQ) e cintura-estatura (RCE), razão ácido úrico/HDLc (AUR/HDL), bem como os índices de Adiposidade Visceral (IAV), Aterogênico do Plasma (AIP) e de insulino-resistência (HOMA-IR). A SM foi determinada usando os critérios do National Cholesterol Education Program (NCEP), da International Diabetes Federation (IDF) e Joint Interim Statement (JIS). Para os fatores associados à SM foram determinados novos pontos de corte usando a curva ROC. A prevalência de SM no climatério foi de aproximadamente 40% e maior quando diagnosticada pelo critério JIS e na pós-menopausa (PM) quando comparada aos outros estágios do envelhecimento reprodutivo (EER). A circunferência de cintura (CC) foi o componente individual mais alterado, estando muito elevada desde a fase reprodutiva tardia (FRT). Glicemia de jejum (GJ) e triglicerídeos (TG) foram os componentes que se associaram significativamente aos EER, estando mais alterados em mulheres na PM. Foram definidos os seguintes pontos de corte para as variáveis associadas à SM em mulheres no climatério: proteína C-reativa ultrassensível (2,2 mg/L); ácido úrico (5,1 mg/dL); apolipoproteína B (120 mg/dL); insulina (6,22 μUI/mL); porcentagem de gordura corporal (33%); RCE (0,57); RCQ (0,86); IMC (26,05 kg/m2 ); HOMA-IR (1,68); IAV (1,76); AIP (-0,03) e razão AUR/HDL (10,2%). Os fatores idade/envelhecimento reprodutivo, status menopausal, baixa escolaridade/renda, sedentarismo, multiparidade, uso de medicamentos, sintomas climatéricos moderados/intensos, obesidade abdominal, inflamação, resistência insulínica, hiperuricemia, dislipidemia e hipoestrogenismo foram associados à SM. RCE, AIP e insulina foram os melhores preditores da SM em mulheres climatéricas. IAV, AUR e AUR/HDL apresentaram boa especificidade e podem ser úteis no acompanhamento de mulheres diagnosticadas com SM. Medidas de controle da obesidade abdominal antes e durante o climatério e de dislipidemia da FRT à PM podem ser essenciais para reduzir a prevalência de SM. Além disto, a otimização dos pontos de corte pode auxiliar na triagem das portadoras da Síndrome, propiciando acompanhamento precoce e consequentemente diminuição do risco de doenças cardiovasculares e diabetes mellitus em mulheres no climatério.
Bacterial vaginosis : prevalence, risk profile and association with sexually transmitted infections.
(2020) Teixeira, Pedro Moregola; Vital, Wendel Coura; Lima, Angélica Alves; Silva, Nayara Nascimento Toledo; Carneiro, Cláudia Martins; Teixeira, Luiz Fernando de Medeiros; Silva, Glenda Nicioli da
Background and Objectives: Bacterial vaginosis (BV) is the most common cause of vaginal discharge in the world. The study aimed to estimate the prevalence and to identify risk factors associated with bacterial vaginosis. Methods: A cross-sectional study was conducted in Ouro Preto, Brazil, between February and December 2017. Three hundred and forty-one women aged 18 years or older, users of the Brazilian Unified Health System, participated in this study. Women who used oral or topical antibiotics in the four weeks prior to the sample collection and women who had undergone a total hysterectomy were excluded from the study. After signing the Informed Consent Form and filling out a questionnaire containing sociodemographic, behavioral and sexual data, the participants were directed to the collection room, where the nurse collected the samples for the preventive examination of the cervix and also two vaginal swabs. Vaginal swabs and cervical samples were analyzed for cytological abnormalities and BV using Gram staining and cytology. Pathogens causing sexually transmitted infections (STIs) were identified by Polymerase Chain Reaction (PCR). For the analysis of the data, statistical package STATA version 10.0 was used. This study was approved by the Research Ethics Committee of the Federal University of Ouro Preto (UFOP). Results: During the study, 341 women were evaluated. The prevalence of BV using Gram staining (32.5% [CI95% 27.737.7%]) and cytology (27.7% [CI95% 23.032.8%]) was similar, however, the sensitivity of cytology was lower (77.8%). Risk factors associated with BV were smoking (IRR 1.5 [CI95%: 1.1 2.1]), use of an intrauterine device (IRR 2.8 [CI95%: 1.2 6.5]), and past medical history of BV (IRR 1.5 [CI95%: 1.1 2.1]). Correlation between the presence of BV and Trichomonas vaginalis (TV) infection (r=0.24) was observed. Conclusion: The prevalence of BV was affected by life habits and was prevalent in women with TV. Thus, behavioral and social prevention approaches to women with diverse risk profiles may help mitigate TV/BV prevalence and recurrence of BV.
Behavior of two Leishmania infantum strains—evaluation of susceptibility to antimonials and expression of microRNAs in experimentally infected J774 macrophages and in BALB/c mice.
(2018) Silva, Stella Costa; Silva, Débora Faria; Almeida, Tamires Cunha; Perasoli, Fernanda Barçante; Silva, André Talvani Pedrosa da; Silva, Glenda Nicioli da; Rezende, Simone Aparecida
Strains of the same Leishmania parasite species, isolated from different host organisms, may exhibit unique infection profiles and induce a change in the expression of microRNAs among host macrophages and in model host mice. MicroRNAs (MiR) are endogenous molecules of about 22 nucleotides that are involved in many regulatory processes, including the vertebrate host immune response. In this respect, the infectivity and susceptibility to antimonials of two L. infantum strains, BH46, isolated from human, and OP46, isolated from symptomatic dog, were characterized in J774 macrophages and BALB/c mice. Parasite burden was assessed in the liver, spleen, and bone marrow using the serial limiting dilution technique. A higher parasite burden was observed in the spleen and bone marrow of animals infected with OP46 compared to BH46 strain. Our results also showed that OP46 was less susceptible to the antimonials. In addition, miR-122 and miR-155 expression was evaluated in the liver and J774 macrophages, and in spleens from infected animals, respectively. An increase was observed in the expression of miR-155 in J774 macrophages infected with both strains compared to uninfected cells, with a higher expression in cells infected with OP46. However, no difference in the expression of miR-122 and miR-155 was observed in the infected animals. Thus, this study shows that OP46 was more infective for mice, it caused a higher increase in miR-155 expression in infected macrophages and was less susceptible to the antimonials evaluated. These data suggest that alteration in miR-155 level likely plays a role in regulating the response to L. infantum.
Brazilian essential oils as source for the discovery of new anti-COVID-19 drug : a review guided by in silico study.
(2021) Amparo, Tatiane Roquete; Seibert, Janaína Brandão; Silveira, Benila Maria; Costa, Fernanda Senna Ferreira; Almeida, Tamires Cunha; Braga, Saulo Fehelberg Pinto; Silva, Glenda Nicioli da; Santos, Orlando David Henrique dos; Souza, Gustavo Henrique Bianco de
The emergence of severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2) in China and its spread worldwide has become one of the biggest health problem due to the lack of knowledge about an effective chemotherapy. Based on the current reality of the SARS-CoV-2 pandemic, this study aimed to make a review literature about potential anti-coronavirus natural compounds guided by an in silico study. In the first step, essential oils from native species found in the Brazilian herbal medicine market and Brazilian species that have already shown antiviral potential were used as source for the literature search and compounds selection. Among these compounds, 184 showed high antiviral potential against rhinovirus or picornavirus by quantitative structure–activity relationship analysis. (E)-a-atlantone; 14-hydroxy-amuurolene; allo-aromadendrene epoxide; amorpha4,9-dien-2-ol; aristochene; azulenol; germacrene A; guaia-6,9-diene; hedycaryol; humulene epoxide II; aamorphene; a-cadinene; a-calacorene and a-muurolene showed by a molecular docking study the best result for four target proteins that are essential for SARS-CoV-2 lifecycle. In addition, other parameters obtained for the selected compounds indicated low toxicity and showed good probability to achieve cell permeability and be used as a drug. These results guided the second literature search which included other species in addition to native Brazilian plants. The majority presence of any of these compounds was reported for essential oils from 45 species. In view of the few studies relating essential oils and antiviral activity, this review is important for future assays against the new coronavirus.
Buccal micronucleus cytome assay : inter-laboratory scoring exercise and micronucleus and nuclear abnormalities frequencies in different populations from Brazil.
(2020) Rohr, Paula; Silva, Gabrieli Flesch da; Vicentini, Veronica Elisa Pimenta; Almeida, Igor Vivian de; Santos, Raquel Alves dos; Takahashi, Catarina Satie; Goulart, Mirian Oliveira; Silva, Glenda Nicioli da; Oliveira, Luiza Barbosa de; Grisolia, Cesar Koppe; Piau, Tathyana Benetis; Branco, Carmen Lucia Bassi; Reis, Érica de Melo; Galvão, Marcos Felipe de Oliveira; Medeiros, Silvia Regina Batistuzzo de; Monteiro, Magaly Sales; Lopes, Reynaldo Assis de Vasconcelos; Brandão, Sabrina Fuziger Inácio; Batista, Nelson Jorge Carvalho; Paz, Márcia Fernanda Correia Jardim; Alencar, Juliana da Silva Araújo
The Buccal Micronucleus Cytome Assay (BMCyt) has become an important biomonitoring tool for assessing cytogenetic damage in many studied populations. Each laboratory applies protocols that vary according to the method of collecting and preparing samples. Besides, Brazil is a country of great territorial extensions that received immigrants from various parts of the world with different genetic backgrounds. Therefore, the present study aimed to evaluate the inter-laboratory variation in scoring the same set of slides using the more comprehensive scoring criteria, to standardize the BMCyt protocol, to observe the basal alterations in populations of different Brazilian regions and to compare it with other places around the world. Our results showed that a valuable number of laboratories participated, ten laboratories from different regions of the country, for the validation of the BMCyt in human biomonitoring studies, resulting in the 804 healthy individuals. This was possible because we observed: a range of measures needs to be considered, such as the baseline frequency of DNA damage and cell death in non-exposed individuals; age when grouped showed an influence on DNA damage, although when evaluated by group we did not see an influence; association between smoking habit and all endpoints of the BMCyt (except karyolytic cells) was evident; the basal MN frequency, in the majority of groups, follows those around the world; and the BMCyt was confirmed as a good health status biomarker. We emphasize the need for constant discussions on the parameters of cell death due to greater difficulty among the analyzers.
Caracterização dos aspectos inflamatório e funcionais do ventrículo esquerdo em cães infectados com a cepa Berenice 78 do Trypanosoma cruzi após terapia com doxiciclina e benznidazol.
(2018) Lopes, Laís Roquete; Silva, André Talvani Pedrosa da; Figueiredo, Vivian Paulino; Silva, André Talvani Pedrosa da; Silva, Glenda Nicioli da; Estanislau, Juliana de Assis Silva Gomes; Silva, Marcelo Eustáquio; Giunchetti, Rodolfo Cordeiro
A cardiopatia chagásica (CC) induzida pelo Trypanosoma cruzi é uma manifestação clínica dependente da resposta inflamatória gerada pelo hospedeiro, ocasionando destruição celular/tecidual e, consequente, remodelamento na matriz extracelular cardíaca. Citocinas, quimiocinas e outras proteínas solúveis ou de membrana participam desta resposta imune e, por isso, estratégias farmacológicas para regular estes mediadores e desacelerar o remodelamento cardíaco na CC tornam-se importantes focos de investigação. Na presente proposta, 30 cães sem raça definida foram infectados (ou não) pela cepa Berenice-78 (Be-78) do T. cruzi e submetidos ao tratamento diário com doses sub-antimicrobial do antibiótico doxiciclina/Dox durante 12 meses de infecção (sendo 50mg/Kg manhã e 50mg/kg noite), em associação (ou não) com o tratamento por 60 dias com o Benznidazol/Bz (7mg/kg – administrado à partir do 8º mês de infecção), fármaco com ação anti-T. cruzi. Antes e durante os 12 meses de infecção, estes animais foram avaliados trimestralmente quanto à função cardíaca (ecocardiografia/ECO) e, após a eutanásia, o tecido cardíaco (átrios e ventrículos) dos animais foram conservados para avaliação: (i) dos aspectos histopatológicos (ii) da cinética da CCL2 plasmática e ventricular esquerda e da expressão dos receptores de quimiocinas (CCR3 a 6, CCR8 e CXCR3), ambos no ventrículo esquerdo (VE). Estes parâmetros foram avaliados, em paralelo à análise ecocardiográfica. Observamos que os tratamentos reduziram a massa cardíaca nos animais. A avaliação histológica mostrou aumento do infiltrado inflamatório no VE dos animais infectados, mas Dox conseguiu reduzi-lo. A produção de CCL2, TNF e IFN-gama no VE foi semelhante em todos os animais infectados, mas no plasma aumentaram no 14º mês de tratamento em relação ao grupo não infectado. Juntos, esses dados apontam para o potencial papel das doses sub-antimicrobianas de Dox, em associação com o Bz, como estratégia farmacológica de melhora morfofuncional cardíaca associada à infecção pelo T. cruzi. Entretanto, novos estudos com diferentes populações genéticas do parasita e com o estudo da farmacocinética de Dox merecem atenção para consolidar essa proposta.
Cell adhesion and growth on surfaces modified by plasma and ion implantation.
(2014) Araujo, Wagner Wlysses Rodrigues de; Teixeira, Fernanda de Sá; Silva, Glenda Nicioli da; Salvadori, Daisy Maria Fávero; Salvadori, Maria Cecília Barbosa da Silveira
In this study, we show and discuss the results of the interaction of living CHO (Chinese Hamster Ovary) cells, in terms of adhesion and growth on glass, SU-8 (epoxi photoresist), PDMS (polydimethylsiloxane), and DLC (hydrogen free diamond-like carbon) surfaces. Glass, SU-8, and DLC but not PDMS showed to be good surfaces for cell growth. DLC surfaces were treated by oxygen plasma (DLC-O) and sulfur hexafluoride plasma (DLC-F). After 24 h of cell culture, the number of cells on DLC-O was higher than on DLC-F surface. SU-8 with silver implanted, creating nanoparticles 12 nm below the surface, increased significantly the number of cells per unit area.

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