Eficácia do tratamento com licnofolida livre e em nanocápsulas em camundongos experimentalmente infectados com cepas de Trypanosoma cruzi de perfis distintos de resistência aos fármacos usuais.

Abstract

A doença de Chagas (DCh) permanece negligenciada. O único fármaco disponível no Brasil para seu tratamento é o benznidazol (BZ), que provoca efeitos colaterais graves e baixa eficácia terapêutica na fase crônica (FC) da infecção. Já foi demonstrado que a licnofolida (LIC), isolada de Lychnophora trichocarpha apresenta atividade anti-T. cruzi in vitro e eficácia terapêutica nas fases aguda (FA) e FC da infecção in vivo. Sendo a LIC uma substância lipofílica com ação citotóxica, uma formulação farmacêutica para carreá-la, como nanocápsulas poliméricas (NC) é viável por permitir liberação controlada de substâncias, seletividade tecidual e redução da toxicidade. Sendo assim, os objetivos deste trabalho foram (I) determinar a eficácia terapêutica da LIC livre e de formulações de NC contendo LIC na FA e FC da infecção em modelo murino infectado com cepas de T. cruzi de distintos perfis de resistência ao BZ e (II) avaliar o real benefício das NC na evolução da infecção e eliminação tecidual do T. cruzi. Para tal, camundongos Swiss foram infectados com as cepas Y (parcialmente resistente ao BZ) e VL-10 (resistente ao BZ) tratados por 20 dias por via oral durante as FA e FC. Tratamentos: (I) Cepa Y – FA/FC: LIC-livre 5,0 mg/kg/dia, BZ 100,0 mg/kg/dia e controles; (II) Cepa VL-10 – FA/FC: LIC-livre 12,0 mg/kg/dia, BZ 100,0 mg/kg/dia, NC-PLAPEG-LIC (8,0 e 12,0 mg/kg/dia – FA) e controles. A avaliação da eficácia terapêutica foi realizada por exame de sangue a fresco (ESF -FA), hemocultura (HC), PCR e ELISA. (i) FA – Cepa Y: Não foi observada cura em nenhum animal tratado com LIC-livre e controles, mas 62,5% dos tratados com BZ foram curados. As taxas de sobrevida foram de 75,0%, 100,0% e 0% dos animais tratados com LIC-livre, BZ e controles, respectivamente, cujo tempo médio de sobrevida foi de somente19 dias. FC – Cepa Y: Ao avaliar os resultados dos exames parasitológicos e ELISA não foi observada cura em nenhum animal dos grupos tratados com LIC-livre, BZ e controles. As taxas de sobrevida foram semelhantes em todos os grupos: 70,0% nos tratados com LIC-livre e controles e 80,0 nos tratados com BZ. (ii) FA – Cepa VL-10: Houve cura em 75,0% e 37,5% dos animais tratados com NC-PLAPEG-LIC 12mg e NC-PLAPEG-LIC 8mg, enquanto nenhum animal tratado com LIC-livre, BZ e dos grupos controles foi curado. FC – Cepa VL-10-: Não foi revelada cura em nenhum animal tratado com LIC-livre. A sobrevida dos animais tratados com LIC-livre, BZ e controles foi de: 70,0%, 80,0% e 60,0% respectivamente. LIC-livre foi capaz de reduzir a parasitemia em animais infectados com as cepas Y e VL-10, mas não curou a infecção. NC-LIC promoveu cura de 75% dos animais infectados com a cepa VL-10 tratados na FA, e apresentou efeito dose x resposta. Os resultados da qPCR foram concordantes em sua maioria (97%) com os resultados obtidos com o controle de cura clássico (negatividade da HC, PCR convencional em sangue e ELISA). Esta técnica demonstrou eficiência > 97,0%, redução do parasitismo tecidual nos animais tratados com LIC-livre e NC-PCL-LIC, e ausência do T. cruzi no tecido cardíaco em 100% dos animais tratados com NC-PLAPEG-LIC, independentemente da cepa e fase da infecção em que o tratamento foi administrado.