Identificação de consórcio bacteriano com potencial biotecnológico para biorremediação de arsênio e sulfato.

Abstract

A contaminação ambiental por metais pesados e sulfato tem sido objeto de diversas discussões e iniciativas. O arsênio é tóxico para a maioria dos seres vivos e pode provocar intoxicações agudas e crônicas em função do tempo de exposição. Dessa forma é necessário o desenvolvimento de metodologias eficientes e economicamente viáveis para a remoção desse elemento em efluentes ou águas residuais. Os métodos biológicos surgem como uma alternativa aos métodos convencionais. O objetivo do trabalho é identificar o consórcio bacteriano, presente em amostras de bactérias coletadas na Lagoa Gambá no município de Ouro Preto capazes de metabolizar o sulfato e arsênio. Após a coleta, as amostras foram cultivadas em frascos contendo meio de cultura líquido Postgate C modificado apropriado para cultivo de bactérias redutoras de sulfato (BRS). Para avaliar a resistência dos consórcios bacterianos ao arsênio, foram utilizadas seis concentrações diferentes: 0,5; 1,0; 2,0; 4,0; 8,0 e 16 mg.L-1 de arsênio trivalente. O potencial de oxi-redução (Eh) do meio foi escolhido como parâmetro de acompanhamento indireto do crescimento das culturas. Alíquotas de 100 ml de cada amostra foram centrifugadas e armazenadas a -20° C para extração de DNA pelo método fenol/clorofórmio. Para amplificação do DNA ribossomal 16S foram utilizados os primers universais com iniciadores 968F-GC 1392R para o Domínio Bacteria. Para análise da diversidade microbiana presente nas amostras, utilizou-se a técnica de DGGE. Em todas as amostras foi possível observar o crescimento de micro-organismos e redução do sulfato evidenciada pela formação de precipitado negro de sulfeto de ferro e diminuição dos valores do Eh. Foi possível obter extração de DNA a partir de todas as amostras estudadas. O resultado do DGGE com os produtos de amplificação geraram 7 bandas diferentes, que foram recortadas, sequenciadas e analisadas no Ribossomal Database Project Release. Os micro-organismos identificados apresentaram 100% de similaridade com as espécies de Pantoea agglomerans, Enterobacter sp e Citrobacter sp, e 99% de similaridade com as espécies Cupriavidus metallidurans, Ralstonia sp e Burkholderia cepacia. Dessa forma o consórcio microbiano identificado neste estudo é bom candidato para o emprego em processos de biorremediação de áreas e efluentes contaminados por arsênio, uma vez que possui resistência ao arsênio e é capaz de promover a redução de sulfato a sulfeto e, em consequência, a precipitação do As.