Caracterização molecular de cepas de Staphylococcus aureus isoladas no Hospital Municipal de Ipatinga-MG.

Abstract

Infecções causadas por Staphylococcus aureus resistente à meticilina podem ter consequências graves para os pacientes de serviços de saúde. Diversas medidas de controle são implementadas no sentido de conter a dispersão destes microrganismos, mas nem sempre são suficientes. O objetivo deste trabalho foi identificar cepas de S. aureus sensíveis (MSSA) e meticilina-resistentes (MRSA) pertencentes ao banco de dados do Laboratório de Análises Clínicas da Prefeitura Municipal de Ipatinga/ MG isoladas de amostras clínicas de pacientes colonizados por S. aureus internados no período de abril de 2008 a abril de 2009. Durante um ano foram identificados 439 isolados e deste conjunto, 50 (11,4%) apresentaram características morfológicas e fenotípicas de S. aureus e destes seis (12%) isolados mostraram resistência a pelo menos um dos 18 antibióticos testados, enquanto nenhuma cepa foi resistente à vancomicina. Para analisar a estrutura populacional de S.aureus foi utilizada a técnica de PCR - eletroforese em gel de poliacrilamida desnaturante (DGGE). Inicialmente, o DNA genômico foi extraído e os amplicons específicos para as regiões V5-V3 do 16S DNAr bacteriano foram obtidos e analisados por DGGE. Nossos resultados sugerem grandes variações genéticas anos isolados de S. aureus. As cepas de MRSA também foram caracterizadas através da análise da expressão de genes envolvidos em resistência utilizando a técnica de qRT-PCR. Nossos resultados mostram uma variação significativa no perfil de expressão entre os genes mecA-1, mecR1-2, mecl3, norA4 e norA5 quando comparamos os isolados de MRSA, sugerindo que o perfil de expressão pode ser influenciado pela variação genotípica observado entre os isolados. Em conjuntos os resultados permitem concluir que vários clones de S. aureus circulavam entre os pacientes de internados no Hospital Municipal de Ipatinga. Futuros experimentos serão realizados para aperfeiçoar o uso da técnica de PCR-DGGE para a identificação rápida de S. aureus.