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Título: Avaliação morfométrica e de critérios não clássicos em amostras cervicais associadas ou não ao HPV e à atipias citológicas.
Autor(es): Sana, Dandara Emery Morais
Orientador(es): Carneiro, Cláudia Martins
Palavras-chave: Farmácia
Data do documento: 2011
Editora / Evento / Instituição: Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. CIPHARMA, Escola de Farmácia, Universidade Federal de Ouro Preto.
Referência: SANA, D. E. M. Avaliação morfométrica e de critérios não clássicos em amostras cervicais associadas ou não ao HPV e à atipias citológicas. 2011. 84 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Farmacêuticas) – Universidade Federal de Ouro Preto, Ouro Preto, 2011.
Resumo: O objetivo deste trabalho foi avaliar amostras cervicais associadas ou não ao HPV e à atipias citológicas quanto ao aumento da razão núcleo/citoplasma (AN/AC) e a presença de critérios citológicos não clássicos para o diagnóstico do papiloma vírus humano (HPV). No período compreendido entre abril de 2008 e julho de 2010, foram coletadas 569 amostras cervicais para a detecção do DNA/HPV por meio da reação em cadeia de polimerase (PCR) e para a realização do exame citológico de Papanicolaou. De acordo com os resultados da análise molecular e citológica, as amostras foram distribuídas em quatro grupos de estudo, com 20 lâminas em cada: HPV-ATIPIA-, HPV-ATIPIA+, HPV+ATIPIA- e HPV+ATIPIA+. Para a análise morfométrica, foram capturados 60 campos de cada lâmina (subdivididas em região da espátula e da escova) em uma objetiva de 40x e ocular de 10x com o auxílio instrumental de uma câmera digital Leica DFC340FX acoplada ao microscópio Leica DM5000B. Foram mensurados os parâmetros área nuclear (AN) e área citoplasmática (AC) por meio do software de morfometria Image J 1.43 para Windows Vista/7 e determinada a razão núcleo/citoplasma (AN/AC). Para a análise dos critérios citológicos não clássicos foram utilizadas as mesmas imagens adquiridas para a análise morfométrica, nas quais foram observados os seguintes critérios: bi ou multinucleação, disceratose leve, queratinização, núcleo hipercromático, núcleo em borrão, núcleo em fibra, coilocitose leve, halo perinuclear, cariorréxe, grânulos querato-hialinos, condensação em filamentos, escamas anucleadas, células fantasmas, células em fibra, células gigantes, células parabasais coilocitóticas. A análise estatística foi realizada através do programa GraphPad Prism 5 com intervalo de confiança de 95%. Nas células avaliadas tanto na região da espátula quanto na região da escova, os testes estatísticos indicaram que a razão AN/AC dos grupos HPV-ATIPIA+ e HPV+ATIPIA+ foram significativamente maiores em relação ao grupo HPV-ATIPIA-. Quanto aos resultados obtidos na análise dos critérios citológicos não clássicos, no grupo HPV-ATIPIA- apenas três lâminas apresentaram quatro ou mais critérios não clássicos, sendo que as demais lâminas apresentaram três (nove), dois (sete) ou um (uma) critérios não clássicos, sendo consideradas realmente negativas. Nos grupos HPV-ATIPIA+, HPV+ATIPIA- e HPV+ATIPIA+ foi possível observar quatro ou mais critérios não clássicos na maioria das lâminas. A presença do HPV não foi determinante na indução de alterações morfométricas significativas utilizando-se os parâmetros AN, AC e razão AN/AC, tanto na região da espátula quanto na região da escova nos esfregaços avaliados. A inclusão de critérios citológicos não clássicos não obteve validade para definir a presença do HPV morfologicamente.
Resumo em outra língua: The objective of this study was to evaluate cervical samples associated or not with HPV and cytological atypias, such as the increase in the nuclear/cytoplasmic ratio (NA/CA) and the presence of non-classical cytological criteria for the diagnosis of human papilomavirus (HPV). Between April 2008 and July 2010, 569 cervical samples were collected for the detection of DNA/HPV using the polymerase chain reaction (PCR) and to realize the cytological test of Papanicolaou. According to the results of cytological and molecular analysis, the samples were distributed in the following groups: HPV-ATYPIA-, HPV-ATYPIA+, HPV+ATYPIA- and HPV+ATYPIA+. For the morphometric analysis, 60 fields were captured for each sample (subdivided into region of the spatula and brush) at a magnification of 40x and eyepiece 10x with the instrumental help of a digital camera Leica DFC340FX attached to the microscope Leica DM5000B. Were measured the parameters nuclear area (NA), cytoplasmic area (CA) through the morphometry software Image J 1.43 for Windows Vista/7 and determined the nuclear/cytoplasmic ratio (NA/CA). For the analysis of cytological criteria were used the same images acquired for morphometric analysis, in which were observed the following criteria: bi or multi-nucleation, mild dyskeratosis, keratinization, hyperchromatic nucleus, smudge nucleo, spindle nucleo, mild koilocytosis, perinuclear halo, karyorrhexis, keratohyalin-like granules, condensation of filaments, anucleate squames, ghost cells, spindle cells, macrocytes and koilocytotic parabasal cells. Statistical analysis were realized using GraphPad Prism 5 with confidence interval of 95%. Significantly larger NA/CA ratios were found for the HPV-ATYPIA+ and HPV+ATYPIA+ compared to HPV-ATYPIA- for cells collected by either a spatula or a brush. Only 3 samples from the group HPV-ATIPIA- showed 4 or more parameters in the samples collected with a spatula, whereas the other samples showed three (nine), two (seven) or one (one) non-classic criteria, being considered truly negative. Among those collected with a brush, were observed four or more non-classical criteria in most of the samples. The presence of HPV was not decisive in the induction of significant changes using morphometric parameters NA, CA and NA/CA ratio for cells collected by either a spatula or a brush. The inclusion of non-classic cytological criteria received no validity to define morphologically the presence of HPV.
URI: http://www.repositorio.ufop.br/handle/123456789/2145
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